超详细的微生物质谱操作流程来了~码住!

超详细的微生物质谱操作流程来了~码住!

QuanID微生物质谱系统是融智生物推出的微生物鉴定质谱产品,它是基于新一代宽谱定量飞行时间质谱平台(新一代MALDI-TOF MS)开发的。QuanID微生物质谱系统的工作原理是将微生物具有种属特异性的核糖体蛋白建立质谱指纹数据库,通过采集未知菌的图谱与数据库的谱图进行比对,从而实现对微生物的种类鉴定,具有快、准、稳、省的优点。

接下来,我们将以细菌为例,详细介绍一下QuanID微生物质谱系统的鉴定流程。

超详细的微生物质谱操作流程https://www.zhihu.com/video/1244678750954049536

01 试剂与材料

  • 微生物基质试剂盒(含A液和B液)
  • 接种环:1μL
  • 微量移液器和吸头:2.5μL

02 对样本的要求

待检样本必须是经培养基分离后的纯化菌落。临床微生物实验室最常使用商品化培养基,包含哥伦比亚血琼脂、沙保氏葡萄糖琼脂培养基等。为了满足鉴定准确性的要求,须采用如表所示时间新鲜培养的菌株。

表 微生物种类及其培养时间微生物类型

注:QuanID微生物质谱鉴定系统不能直接检测临床标本或混合培养物。

03 操作流程

3.1 样本前处理

细菌制备采用直涂法。所有操作均应遵守实验室生物安全要求。

1) 使用1μL接种环挑取合适菌落。


2) 将微生物菌落涂在靶点中央位置,并摊涂均匀,形成薄层。

3) 用移液器滴加2μL B液,待其自然干燥后,滴加1.5μL A液于靶点正中,自然干燥,待测。

注意:

  • 操作靶板时应戴无粉手套。
  • 用接种环挑取菌落时不要粘上培养基,否则不利于微生物的鉴定。
  • 某些单菌落生长非常小的微生物,需要挑取几个相似菌落并涂在同一靶点。
  • 每个靶点只允许涂同一株菌,每次操作须更换接种环和移液器吸头。
  • 制备好的靶板在检测前应处于室温。
  • 制备好靶板后,须在48小时内进行微生物鉴定。

3.2 上机


3.3 数据采集

3.4 数据分析


*仅供科研使用

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